بیان استرپتوکیناز نوترکیب استرپتوکک گروهA در باکتری اشرشیاکلی

Authors

  • مسیبی, قاسم
  • مولایی, ندا
Abstract:

  زمینه: استرپتوکیناز A از جمله پروتئین­های ترشحی استرپتوکک پیوژن است که قدرت آنتی­ژنیک دارد . از این پروتئین می­توان جهت سیال کردن چرک در ذات­الریه و ورم مفصلی چرکی و همچنین به عنوان آنتی­ژن برای تشخیص عفونت­های استرپتوککی گروه A استفاده کرد.   هدف: مطالعه به منظور تولید استرپتوکیناز استرپتوکک گروه A نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی انجام شد.   مواد و روش­ها: در این تحقیق تجربی با طراحی پرایمر اختصاصی و استفاده از روش PCR ، ژن استرپتوکیناز A از استرپتوکک پیوژن تکثیر و در ناقل پلاسمیدی pET32a جهت بیان کلون شد . پلاسمید SKA - pET32a وارد اشریشیاکلی سویه BL21-DE3-plySs شد. تولید پروتئین با القا توسط IPTG و بهینه­سازی شرایط انجام شد. پروتئین نوترکیب با کیت Ni-NTA خالص و مقدار پروتئین نوترکیب تولید شده با روش برادفورد اندازه­گیری شد. آزمایش وسترن بلات برای تأیید پروتئین نوترکیب انجام شد . ترادف نوکلئوتیدی ژن تکثیر شده با روش سنگر تعیین شد.   یافته­ها: ترادف ژن تکثیر شده که در پلاسمید pTZ57R/T کلون شده بود با ترادف ثبت شده برای ژن استرپتوکیناز A در بانک ژن، یکسان بود. مقدار پروتئین تولید شده با استفاده از روش برادفورد 3 میلی­گرم بر میلی­لیتر به دست آمد. پروتئین استرپتوکیناز نوترکیب تولید شده با سرم موش واجد آنتی استرپتوکیناز A واکنش داد. پروتئین تولید شده وزنی در حدود 67 کیلو دالتون داشت و خاصیت آنتی­ژنیک خود را به خوبی حفظ کرد.   نتیجه­گیری: بیان پروتئین نوترکیب استرپتوکیناز A در میزبان اشرشیاکلی نیز امکان­پذیر است. بنابراین می­توان از آن در تشخیص بیماران مبتلا به عفونت­های استرپتوککی گروه A به جای آزمایش­های آنتی­استرپتولایزین O (ASO) و استرپتولایزین O ( SLO ) استفاده کرد.  

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بیان استرپتوکیناز نوترکیب استرپتوکک گروهa در باکتری اشرشیاکلی

زمینه: استرپتوکیناز a از جمله پروتئین­های ترشحی استرپتوکک پیوژن است که قدرت آنتی­ژنیک دارد . از این پروتئین می­توان جهت سیال کردن چرک در ذات­الریه و ورم مفصلی چرکی و همچنین به عنوان آنتی­ژن برای تشخیص عفونت­های استرپتوککی گروه a استفاده کرد.   هدف: مطالعه به منظور تولید استرپتوکیناز استرپتوکک گروه a نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی انجام شد.   مواد و روش­ها: در این تحقیق تجربی با طراحی پرایمر اختصاص...

full text

بیان پروتئین نوترکیب استرپتولیزین o استرپتوکک پیوژن در باکتری اشریشیاکلی

مقدمه: استرپتولیزین o از جمله پروتئین های ترشحی استرپتوکک پیوژن بوده که دارای قدرت آنتی ژنیک می باشد. امروزه با ردیابی آنتی بادی های ضد این پروتئین روند عفونت ناشی از این باکتری پی گیری می شود. تاکنون تولید نوترکیب این پروتئین با استفاده از ناقلین بیانی دارای پروتئین الحاقی صورت گرفته است. در این تحقیق سعی گردیده تا تولید پروتئین با استفاده از ناقلین بدون پروتئین الحاقی انجام پذیرد. روش کار: در...

full text

استرپتوکیناز: استخراج،کلون‌سازی و بیان بالای پروتئین نوترکیب فعال

Abstract: Background: Streptokinase has been widely prescribed as a fibrinolytic agent for myocardial infarction. Simple structural characteristics of this protein have provided techniques for production of different recombinant types of this protein. The present study was designed to prepare equisimilisH46A subtype of streptokinase in our country. Materials and methods: Having extracted the...

full text

کلون، امتزاج و بیان نوترکیب ناحیه 4 آنتی‌ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با زیرواحد B کلرا توکسین در باکتری اشرشیاکلی

زمینه و هدف: ترکیب یا اتصال ژنتیکی آنتی ژن ها با زیر واحد B کلرا توکسین =cholera toxin B) (ctB پاسخ آنتی‌بادی موکوسی قوی ای را ایجاد می‌کند. هدف از این مطالعه اتصال ctB به ژن کد کننده ناحیه 4 آنتی ژن حفاظت کننده (Protective antigen Domain 4=PaD4) به منظور بیان پروتئین کایمریک به عنوان کاندیدا واکسن علیه بیماری سیاه زخم می باشد. روش بررسی: در این تحقیق تجربی آزمایشگاهی واکنش PCR با پرایمرهای ا...

full text

بهینه سازی تولید آنزیم استرپتوکیناز نوترکیب در باکتری اشریشا کلی

زمینه و هدف: استرپتوکیناز از جمله پروتئین های ترشحی استرپتوکک پیوژن است. این پروتئین در بیماریزایی باکتری نقش مهمی دارد. در این تحقیق سعی بر تولید بالای این آنزیم به شکل نو ترکیب بوده به طوری که محصول با تغییر ترکیب محیط کشت و تعداد باکتری القاء شده افزایش یابد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، با استفاده ازروش pcr، ژن استرپتوکیناز از استرپتوکوک پیوژن تکثیر گردید. پس از تخلیص، ژن در ناقل پلا...

full text

استرپتوکیناز: استخراج،کلون سازی و بیان بالای پروتئین نوترکیب فعال

چکیده سابقه و هدف: استرپتوکیناز به عنوان شناخته شده ترین داروی فیبرینولیتیک، مدت مدیدی است در درمان سکته قلبی استفاده می شود. ویژگیهای ساختاری ساده این پروتئین زمینه لازم برای دستیابی به انواع نوترکیب آن را فراهم ساخته است. هدف از این تحقیق تهیه سوش استرپتوکوک equisimilis h46a (پربازده از نظر تولید استرپتوکیناز) برای اولین بار در ایران بود تا پس از استخراجdna ، ژن استرپتوکیناز بگونه ای تکثیر شو...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 16  issue 3

pages  11- 18

publication date 2012-10

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023